淋球菌感染的诊断

　　淋球菌(Neisseria gonorrhoeae，NG)是淋病奈瑟菌的简称，是引起淋病的病原体。人体感染淋球菌初期，常为无症状性淋病，如不及时治疗便会引起严重的泌尿生殖道 疾病。诊断方法有，涂片检查，培养检查，抗原检测，基因诊断，药敏试验及产青霉素酶淋球菌(PPNG)测定。

　　1、涂片检查：取 患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作革兰染色，在多形核白细胞内找到革兰阴性双球菌。涂片法特异度较高，对急性患者灵敏度也较高，对慢性患者灵敏度较差。女性 宫颈分泌物中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为50%～60%，且有假阳性，适合用培养法检查。慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少，阳性率低，因此要 取前列腺按摩液，以提高检出率。咽部涂片发现革兰阴性双球菌不能诊断淋病，因为其他奈瑟球菌属在咽部是正常的菌群，需做糖发酵试验进一步诊断。另外对症状 不典型的涂片阳性应作进一步检查。

　　2、培养检查：淋球菌培养是诊断的重要佐证，培养法对症状很轻或 无症状的男性、女性患者都是较敏感的方法，只要培养阳性就可确诊，也是目前诊断无症淋球菌感染的唯一可靠的方法。在基因诊断问世以前，培养是世界卫生组织 推荐的筛选淋病的惟一方法。目前国外推荐选择培养基有改良的Thayer-Martin(TM)培养基和New York City(NYC)培养基。国内采用巧克力琼脂或血琼脂培养基，均含有抗生素，可选择地抑制许多其他细菌生长。在36℃，70%湿度，含5%～10%二氧 化碳(烛缸)环境中培养，24～48h观察结果。培养后还需进行菌落形态，革兰染色，氧化酶试验和糖发酵试验等鉴定。培养阳性率男性80%～95%，女性 80%～90%。

　　3、抗原检测：

　　(1)固相酶免疫试验(EIA)：可用来检测临床标本中的淋球菌抗原。先用稀释的标本液包被载体，然后加入抗淋球菌抗体，再加入辣根过氧化酶偶联的羊抗兔免疫璩蛋白，以上各步均经温育，水洗，最后加底物显色，并用分光光度计记录数据，分析结果。

　　(2)直接免疫荧光试验：通过荧光标记的单克隆抗体直接检测淋球菌外膜蛋白-1。此法不仅敏感性较好，且无交叉反应，是一种快速而准确的方法。在女性患者的标本检验中也获得较好的效果。

　　(3)协同凝集试验用抗淋球菌蛋白I单克隆抗体致敏葡萄球菌A蛋白可与淋球菌发生协同凝集反应。此试验简易、快速、不需特豫设备，敏惑性与特异性均较高。

　　4、基因诊断：

　　(1)基因探针诊断：淋球菌的基因探针诊断，所用的探针有：质粒DNA探针、染色体基因探针和rRNA基因探针。基因探针诊断的敏感性较差。DNA探针法的敏感性与特异性均较高，是诊断淋病的一种快速可靠的方法，但此法由于条件所限，不便普及。

　　(2)基因扩增检测：PCR技术的出现进一步提高了淋球菌检测的灵敏性，它具有快速、灵敏、特异、简便的优点，可以直接检测临床标本中极微量的病原体，但因实验条件要求高，技术难掌握。操作时要防止污染，以免出现假阳性。

　　5、药敏试验：在培养阳性后进一步作药敏试验。用纸片扩散法做敏感试验，或用琼脂平皿稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，用以指导选用抗生素。

　　6、PPNG检测：β内酰胺酶，用纸片酸度定量法，使用Whatman I号滤纸PPNG菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为P-PPNG，阴性为N-PPNG。

2014-11-21 08:59:51