衣原体感染的实验室检测

　　衣原体感染后能诱导产生型异性细胞和体液免疫。但保护性不强，为时短暂，因此衣原体的感染常表现为持续感染，反复感染或隐形感染。有些衣原体抗原注入人皮后内可造成免疫病理损伤。

　　一、衣原体感染的抗原检测

　　1.直接涂抹染色(DT)法

　　传统的结膜刮片和宫颈拭子经姬姆萨或碘染色检查上皮细胞浆内有无包涵体是衣原体检查常用的筛选试验，如果操作和标本采取得当，其特异性强，结果可靠，但敏感性差，尤其是碘染色，只能检查含糖原的包涵体。

　　2.细胞培养法

　　用于衣原体培养者，常用经放线菌酮处理的单层McCoy细胞，经孵育后，用荧光标记的抗体，酶结合的单克隆抗体，碘或姬姆萨染色，胞浆中出现特征性的包涵体，即可考虑有衣原体的存在，本法的敏感性为80%～90%。

　　3.酶联免疫吸附试验(ELISA)

　　ELISA是用来检测临床标本中衣原体抗原的一种有效方法。

　　4.直接免疫荧光法(DFA)

　　本法简便，快速，特异性好，敏感性和特异性随标本部位及人群而异，新生儿结膜炎的阳性率达100%，(而组织培养为94%)鼻咽部标本的敏感性为85%，特异性为75%。

　　5.斑点免疫结合法(DIBA)

　　本法是以微孔薄膜作固相载体，吸附抗原后进行的抗原抗体反应，在膜上出现着色斑点为阳性结果，其敏感性为100%，特异性为92.4%，与细胞培养法比较，其符合率为96.7%，DIBA适用于大批量标本的检测，但结果需3天。

　　6.核酸探针

　　随着分子生物学技术的发展，DNA杂交技术已进入衣原体检测领域，以82S标记7Md质粒制备的探针，检出Ct的敏感性和特异性分别为91%和80%，用沙眼衣原体性病淋巴肉芽肿(LGV)-Ⅱ的质粒DNA和LGV-I的染色体DNA作探针，可特异性地检测沙眼衣原体的15个血清型抗原。

　　7.聚合酶链反应(PCR)

　　PCR是近年发展起来的新技术，能使核酸分子按几何级数扩增，使样品中极微量的核苷酸分子迅速地扩增，然后通过核酸分子的检测获得极敏感的结果，PCR简便快速，具有高度的敏感性和特异性，且可同时从标本中直接鉴定衣原体的种和型别，从7.5Kb质粒ORF-3选择了一对具有种特异性引物，经40次PCR循环，电泳检测的灵敏度达10-17gDNA。

　　二、衣原体感染的抗体检测

　　抗体检测的价值不大，因生殖道感染无并发症者仍产生低滴度的抗体;约20%急性衣原体尿道炎患者不产生抗体;有人认为IgA意味着现症感染，但PID者可长期存在IgA，衣原体抗体检测的常用方法有以下几种。

　　1.补体结合试验(CFT)

　　适用于LGV，鹦鹉热及肺炎衣原体感染的诊断，其敏感度较低，当效价≥1∶32提示为衣原体感染，但不能鉴别其种类，用于LGV的证实试验，要求效价≥1∶64。

　　2.微量间接免疫荧光试验

　　本试验是诊断肺炎衣原体感染最敏感的方法之一。

2014-07-31 09:47:10